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【求助】关于构建虫荧光素酶报告基因重组质粒的一个问题!

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我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞?

若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢
继续求助中。。。
继续求助中。。。
我也在做这样一条信号通路,NFkB信号通路有商品化的报告基因,promega有,便宜一点的话,国内的碧云天也有,买来直接用就可以了!也可以在下游再找一个具体的基因,克隆启动子,装到pGL3-basic中测,作为补充数据。
xiongran wrote:
我也在做这样一条信号通路,NFkB信号通路有商品化的报告基因,promega有,便宜一点的话,国内的碧云天也有,买来直接用就可以了!也可以在下游再找一个具体的基因,克隆启动子,装到pGL3-basic中测,作为补充数据。


非常感谢楼上的回复!我已经购买了promega的NFkb的报告基因,但是因为没有做过类似的实验,想请教:Promega的报告基因是基于NFkb结合的一段保守序列构建的重组质粒,是不是NFkb调控的所有下游基因都具有这样一致性的结合序列?也就是您提出的,还需要将下游一个具体的基因启动子构建重组质粒,作为补充检测数据?其他转录因子是否也有类似的情况?

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