转化含有质粒的菌株
最新修订时间:
材料与仪器
细胞
YPAD
培养瓶 SC 减样选择培养基
YPAD
培养瓶 SC 减样选择培养基
步骤
1. 在一个 250 ml 的培养瓶中,接种该菌株到 25 ml 相应的 SC 减样选择培养基中,200 r/min 培养过夜。
2. 检测每毫升细胞数,按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。
3. 将该体积的培养物加到一个 50 ml 的无菌离心管中,3000 g 离心沉淀细胞。
4. 倒掉培养基,用 50 ml 预热的 YPAD 重悬细胞,转移到一个 250 ml 的培养瓶中。
5. 继续按高效转化法中步骤 4 进行操作。
2. 检测每毫升细胞数,按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。
3. 将该体积的培养物加到一个 50 ml 的无菌离心管中,3000 g 离心沉淀细胞。
4. 倒掉培养基,用 50 ml 预热的 YPAD 重悬细胞,转移到一个 250 ml 的培养瓶中。
5. 继续按高效转化法中步骤 4 进行操作。
来源:丁香实验