风信子wangr
我最近在做双荧光素酶报告实验,有个疑问海肾的荧光太强了。不知道大家遇到过吗,如何处理。理论上空载和过表达转录因子的两组海肾的荧光应该差不多吧,但是我做出来转录因子组比空载组高出了三倍多。萤火虫荧光增加了不明显,1.5倍左右,所以数据处理的时候萤火虫/海肾荧光比值变小了,趋势反了。转染条件:24孔板,0.1ug海肾+0.5ug荧光素酶报告基因质粒+0.5ug空载/转录因子.有大神可以解答么。
huarenqiang5
不同质粒转染效率不同所致,不同质粒抽提质量不一可能是导致这种现象的重要原因之一。建议采用pGL4以上的系统。
土井挞克树
海肾做一些消除荧光的预处理会好一些
风信子wangr
您好,怎么进行消除荧光的预处理,能具体讲一下吗?谢谢
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