免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):IgM的分离与提纯
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(一)材料
1 .血清
2 .葡聚糖凝胶 G200
3 .洗脱液 0.01Mol/L pH7.4PBS ( 0.14Mol/L NaCl 或 0.1Mol/L pH8.0 Tris - HCl 0.14Mol/L NaCl )。
(二) 操作方法
选取 2.50cm × 90cm 层析柱,用葡聚糖凝胶 G200 装柱,平衡后,直接加血清样品 10ml 或硫酸铵粗提制品,洗脱液洗脱,流速 0.25ml/min ,分管收集,测 OD280 值,第一峰即为 IgM 。将第一峰的数管混合,浓缩、鉴定。