ISNT的流式细胞仪分析

ISNT的流式细胞仪分析流程：

1．离心收集细胞，PBS洗1～2次
　　2．1%多聚甲醛低温下固定15min。
　　3．3ml PBS洗1次，70%乙醇固定，冰箱内放置1～3天。
　　4．PBS轻洗1次。
　　5．2×10⁵细胞与12.5μl的缺口平移缓冲液在15℃共孵育6h，每过15min振动1次。
　　6．PBS轻洗1次。
　　7．细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。
　　8．含0.1%Triton-X 100的PBS轻洗1次。
　　9．1ml PBS（含5mg/ml PI，0.1% RNase A）重悬。
　　10．流式细胞仪分析红色（PI）对绿色荧光（FITC）的地形图。