流式细胞仪的细胞分析原理
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待测细胞被制成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后加入样品管中,在气体压力推动下进入流动室,流动室内充满鞘液,在鞘液的约束下,细胞排成单列出流动室喷嘴口,并被鞘液包绕形成细胞液柱。
这种同轴流动的设计,使得样品流和鞘液流形成的流束始终保持着一种分层鞘流的状态。鞘液和样品流组成一个圆形的流束,一起自喷嘴的圆形宝石孔喷射出来,进入流动室,与水平方向的激光光束垂直相交。该区称为测量区。
利用样品流和鞘流的气压差的层流原理,使细胞依次排列成单行,每个细胞以均等的时间依次通过测量区,被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后发出荧光,同时产生散射光。
细胞发出的荧光信号和散射光信号,同时被荧光光电倍增管接收,被积分放大反转换为电子信号输入电子信息接收器、通过计算机快速而精确地将所测数据计算出来,结合多参数分析,从而实现了细胞的定量分析。