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流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析问题

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丁香实验

流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析:请教各位老师,我做的是药物诱导细胞凋亡的实验,不同浓度药物作用细胞24小时候用Annexin-V PI双染,流式细胞仪检测,得到结果如下,请问:
1、怎么根据散点图及其中的数据算得凋亡率?2、怎样用SPSS对凋亡率进行比较分析?3、我只进行了一次实验,能否用SPSS进行分析?是不是必须至少进行两次实验才行?
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7 个回答

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莹啊免疫啊

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感觉分群分的不太好,至少得重复三遍才行,试试看第二遍时候会不会好一点。
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马小羊

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annexin v指示的是膜外翻的情况(凋亡早期),pi染核酸,要细胞膜通透性改变了才能染上,提示凋亡晚期和坏死情形,所以这个分析要结合你关注的凋亡阶段。 SPSS分析没有必要,有了比例数据(需重复),直接放graphpad里做个t检验不香吗?
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西柚味的芋圆

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你这个俩群分的也太不明显了,实验过程中是不是操作没有注意。细胞是贴壁细胞还是悬浮细胞,有没有用胰酶消化。做凋亡一定注意每次实验细胞密度,细胞状态的影响?我一般会加一个阳性对照,和单染。
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txs900416

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四个象限中,左下是活细胞,左上是坏死,右上是晚凋,右下是早凋。如果只看凋亡就是右上+右下。SPSS分析通过比较实验组和对照组的数值选择合适的检验方法分析,实验组和对照组至少每个都要有3个样本才能进行分析。考虑到实验的可重复性,最好是三次独立样本的重复试验最可靠。
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peaceful13

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首先,流式检测细胞的凋亡率需要先进行FSC VSSC的主要群体进行圈门,然后再看Annexin V 跟PI的阳性率计算。从你的实验结果来看,还有可能存在一个问题就是FL1 VFL2的补偿是否有调节,如果调节正确的话,Annexin V+PI -的细胞早凋的细胞,直接看这个象限的百分比,Annexin V + PI +的细胞晚期凋亡的细胞,凋亡率为这个象限的百分比。SPASS分析应该都需要2次,最好是3次重复
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颜渊溪桥

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虽然没用过spss统计过凋亡,但我们测凋亡实验常做,一般在Flowjo软件上圈出所有细胞,排除细胞碎片,再用AV-A和PI-A画十字门,凋亡细胞比例统计的是AV+PI+和AV+PI-,凋亡早期的细胞统计AV+PI-
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dxy_0mxazdaw

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Annexin V代表凋亡的早期,PI代表凋亡晚期,通常我们统计的是两者双阳性的那一群。另一个问题,所有实验都要进行至少三次,才能够进行统计。
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