人绒毛膜癌细胞株JAR的传代
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1997
最初,用0.25%胰酶消化液传代,细胞脱壁容易,但是,吹打细胞180次左右,也只有80%细胞是单个细胞,而且,易引起细胞机械性损伤。于是,我改进方法。
现在,我的处理如下:
弃旧培养液
0.02%EDTA作用2分钟
弃EDTA
0.1%胰酶作用30秒
弃胰酶,继续消化2分钟
加培养液终止消化。一般吹打细胞30-40次,细胞基本为单个。
EDTA是一种化学螯合剂,主要作用主任已说。我要提醒一下:EDTA作用不受血清抑制,故消化后需彻底清除,否则影响细胞生长。
建议:可能的话离心一下。