MKN-28胃癌细胞株的消化传代
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弃血清---PBS洗一或两遍---加1-2ml的消化液(0.1%的胰酶+0.02%的EDTA)消化45秒作用(不用放回培养箱,细胞面紧贴自己的手掌心,平放)---弃去胰酶后让残留的胰酶再作用1分钟----立即加含血清培养基终止胰酶的作用---轻轻吹打细胞很容易就脱离瓶壁。注意,吹打次数不要太多,机械损伤对细胞的损害非常大,吹打过程中也不要有太多气泡,以免气泡的剪切力损害细胞。
一般而言,细胞消化传代后,第二天应常规换一次液。
消化的时候,温度对胰酶活力的影响也很大,相同浓度的胰酶冬天的时候消化细胞所需的时间就比夏天要长的多。
SGC-7901胃癌细胞的消化传代
大致步骤同上,但胰酶作用的时候应放在培养箱中,夏天0.1%的胰酶消化2分钟左右就够了,但冬天差不多要8分钟左右
MDA-MB-231乳腺癌细胞消化传代
基本同MKN-28,只是消化时间可稍长一点,1分钟左右。