常用的几种分子标记
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RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。
SSR 真核生物的基因组中散布着大量的串联重复序列,其中, 2-4 个 bp 的微卫星序列 (Microsatellite 或叫简单序列重复 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多态性。 微卫星在结构上的最大特点是两端序列较保守, SSR 引物根据与微卫星重复序两端的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身,从而揭示微卫星的多态性。 SSR 是检测多态性的一种有效方法。
微卫星( SSR )是广泛分布于真核生物基因组中的短串联重复序列( 1 - 7bp ), SSR 实验一般检测到的是一个单一的多等位基因位点;是共显性遗传,可鉴别杂合子和纯合子;结果重复性很高。通常使用聚丙烯酰胺凝胶电泳,分辨率高,可检测出单拷贝差异。 SSR 广泛应用于生物遗传作图、群体遗传研究、个体间亲缘关系鉴定等方面。
建立于DNA基础之上的分子标记对于作物改良具有重要作用。
AFLP(Amplified fragment length polymorphism,简称AFLP)国内译为扩增片段长度多态性,是一种DNA分子标记技术。利用这一方法,在不需要预先知道DNA序列信息的情况下就可以同时进行多数DNA酶切片的PCR扩增。目前,该技术不仅在小麦、玉米、棉花和大豆等主要农作物上得以应用,而且在蔬菜(番茄、马铃薯、鹰嘴豆等)以及植物基因组研究的模式植物拟南芥上广泛应用。讨论了AFLP在主要作物的品种鉴定、遗传多样性分析、遗传作图、基因定位以及辅助选择等方面的应用进展。
RFLP、RAPD、AFLP、SSR等已经广泛应用于DNA指纹分析、种质资源遗传多样性分析、基因定位、遗传作图、分子标记选择育种等。用于作物育种的分子标记技术主要有RFLP、RAPD、SSR、 AFLP、STS等。它们主要用于构建分子标记遗传图谱、分子标记筛选育种亲本、鉴定品种、标记目的性状基因等方面 。