几种常用特殊PCR技术
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几种常用特殊PCR技术
(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)
RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.
设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA扩增产物。
(二)多重PCR(Multiple PCR)
在同一PCR反应体系中用多对引物(覆盖不同长度的靶序列)同时扩增。
例如用多重PCR进行DNA缺失筛选
(三) 套式PCR(nested PCR)
用第一次PCR扩增区域内部的第二对(套式)引物对第一次PCR产物再次扩增,可以增加特异性和灵敏度。
(四)非对称PCR(asymmetric PCR)
在PCR反应体系中,限制引物之一的浓度(50-100:1)进行扩增,可得到单链PCR产物,可用于制备单链测序模板或单链DNA杂交探针。
来源:检验世界网