关于小鼠腹腔巨噬细胞的几个问题
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最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞, 有如下几个问题需要和大家讨论,望经验丰富的同志指点一二。
1. 关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物, 是不是注射后有两大特点:第一,得到的细胞更多, 第二,得到的细胞都是炎性巨噬细胞, 而未注射则是非炎性细胞?
我做了十来次, 有时注射有时不注射(淀粉肉汤), 注射后细胞确实多一些。 至于炎性与非炎性,有待指教。
2. 关于分离的巨噬细胞的纯度问题。 我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。 一开始纯化完铺板, 基本上看不到成纤维细胞。 可是大约12小时之后能够看到几个,24小时之后能够看到大约30%, 48小时成纤维细胞能够占据的大约70%的比例。 这已经让我完全无法做实验了。 另外,我发现注射肉汤后成纤维细胞要少一些。 我打算用抑制细胞增殖的5-BrdU来抑制成纤维细胞的增殖,但是不知道会不会对巨噬细胞有影响。有没有人碰上类似情况,请交流。
3. 关于小鼠周龄的问题。我基本上没有太在乎这个, 6-8周龄的做过,更长的也做过,似乎区别不大。