待胶体金标记蛋白质的准备

（一）原理
蛋白质在等电点或稍偏碱的情况下，根据电荷正负相吸的原理；被吸收附于胶体金颗粒表面，使其牢固结合，一般胶体金颗粒表面带负电，与蛋白质所带的正电荷基团间靠静电引力作用相结合。另外，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒表面，形成一个蛋白层，从而阻止了胶体金颗粒的相互接触，使标记蛋白质的金探针较为稳定。
（二）待胶体金标记 蛋白 质的准备
1 ．透析除盐
蛋白质在提取和纯化过程中会保留一部分盐类成分，但用于胶体金标记的蛋白质应尽量降低电介质的成分，因此，在用前必须将多余的电介质除去。因为过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位，影响蛋白质的吸附。方法：将待标记的蛋白质装入透析袋中，用 蒸馏 水或低浓度的盐水(0.005mol/LNaCl，pH7.0)透析2h。
 2 ．去除聚合的蛋白质
对于长期低温保存的蛋白质，特别是浓度超过2mg/mL，很容易形成聚合物，这些聚合物可影响标记效率及胶体金探针的稳定性，因此在标记前应离心除去，用时以100000g于4℃离心1h即可。调整蛋白质浓度至lmg/mL即可用于标记。