材料与仪器
高分子量 DNA
TE 缓冲液
微量离心管
TE 缓冲液
微量离心管
步骤
一、单链载体 DNA 的制备
1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA，用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。
2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒；应将探头在溶液中持续移动，以保证超声处理的均一性。
3. 在每次脉冲过后，吸取 100 μl 超声过的样品加到 1.5 ml 的微量离心管中，置于沸水浴中 5 分钟，冰水浴中快速冷却。
4. 当经过煮沸和快速冷却的 DNA 样品能容易地吸取时，分装 1 ml 和 10 ml 的等份，储存于 -20℃。一般需经过 3 到 4 次 30 秒的脉冲，DNA 样品才变得容易吸收。在使用前，将保存的 1 ml 等份样品煮沸 10 分钟并在冰水浴中快速冷却。单链载体 DNA 可被煮沸、冻存及再使用 3 到 4 次。
1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA，用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。
2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒；应将探头在溶液中持续移动，以保证超声处理的均一性。
3. 在每次脉冲过后，吸取 100 μl 超声过的样品加到 1.5 ml 的微量离心管中，置于沸水浴中 5 分钟，冰水浴中快速冷却。
4. 当经过煮沸和快速冷却的 DNA 样品能容易地吸取时，分装 1 ml 和 10 ml 的等份，储存于 -20℃。一般需经过 3 到 4 次 30 秒的脉冲，DNA 样品才变得容易吸收。在使用前，将保存的 1 ml 等份样品煮沸 10 分钟并在冰水浴中快速冷却。单链载体 DNA 可被煮沸、冻存及再使用 3 到 4 次。
来源：丁香实验
