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材料的准备

相关实验:酿酒酵母的电穿孔转化法实验

最新修订时间:

材料与仪器

高分子量 DNA
TE 缓冲液
微量离心管

步骤

一、单链载体 DNA 的制备

1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA,用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。

2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒;应将探头在溶液中持续移动,以保证超声处理的均一性。

3. 在每次脉冲过后,吸取 100 μl 超声过的样品加到 1.5 ml 的微量离心管中,置于沸水浴中 5 分钟,冰水浴中快速冷却。

4. 当经过煮沸和快速冷却的 DNA 样品能容易地吸取时,分装 1 ml 和 10 ml 的等份,储存于 -20℃。一般需经过 3 到 4 次 30 秒的脉冲,DNA 样品才变得容易吸收。在使用前,将保存的 1 ml 等份样品煮沸 10 分钟并在冰水浴中快速冷却。单链载体 DNA 可被煮沸、冻存及再使用 3 到 4 次。

来源:丁香实验

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