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T细胞克隆技术

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T 细胞克隆技术
T细胞在机体特异性免疫应答中发挥举足轻重的作用,其特异性识别的靶分子与B细胞(或抗体)明显不同,不是抗原分子上的天然表位,而是由MHC分子提呈的抗原肽(T细胞表位)。由于T细胞识别的这种特点,决定了对其特异性的研究必须考虑抗原肽的性质和提呈抗原肽的MHC分子型别。
T细胞克隆的建立对于T细胞在免疫应答中的功能研究具有重要的意义。由于T细胞上TCR识别的抗原肽需要MHC分子提呈(即MHC限制性识别),而且T细胞的活化还需要第二信号(例如APC上B7分子与T细胞上CD28分子的结合)和细胞因子(例如IL-2)的作用。所以对抗原特异性T细胞进行克隆和扩增,需要抗原提呈细胞(antigen-presenting cells, APC)。抗原提呈细胞在下述的实验中,可以是自身或同的外周血单个核细胞(MNC),也可以是表达MHC分子的其他细胞。另外,T细胞克隆中采用有限稀释法将单个T细胞扩增为克隆,而单个细胞的生长和增殖需要伺养细胞,所以均使用经射线灭活的细胞作为伺养细胞。
T细胞克隆技术以刺激细胞与效应细胞混合培养为基础,采用有限稀释法分离特异性T细胞克隆。按其特异性分为抗原特异性T细胞克隆和抗原非特异性T细胞克隆。按其功能则可分为辅助性和细胞毒性T细胞克隆。
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