GC测椒目仁油中α-亚麻酸

摘要：目的：建立椒目仁油中α-亚麻酸含量测定的方法；方法：采用气相色谱法，将样品酯化后检测其中的α-亚麻酸的含量；结果在该色谱每件下测得椒目仁油中α-亚麻酸的平均含量为70.47%，精密度RSD=2.76%，平均加样回收率为98.36%，RSD=3.62%；结论：椒目仁油中舍有较多的α-亚麻酸，是一种极待开发利用的油脂资源。

关键词：α-亚麻酸 椒目仁油 气相色谱法

Abstract Objetives To determine the methods of measurement ofα-linolenic acid in the Zanthoxylum bungeanum Maxim seeds oil Methods To used by gas chromatography after the samples have been esterified． Results The average contents are 70.47%,the RSD of precision is 2.76％,the average rate of recovery is 98.36%． Conclusions Since the contents ofα-linolenic acid in the Zanthoxylum
bungeanum Maxim seeds oil is high,the oil can be a useful source to be developed．
Key Wordsα-linolenic acid Zanthoxylum bungeanum Maxim seeds oil gas chromatography

    椒目为芸香科植物青椒Zanthoxylum schinifolium Sieb．et Zucc．或花椒Zanthoxylum bungeanum Maxim的干燥成熟种子。秋季果实成熟时采收，晒干，除去果皮、果柄及杂质田。椒目含油约22-29%，高于大豆、棉籽的含油量；且椒目油中含有丰富的Ca、Mg、Fe、Zn及Sr、Mn等人体必须的矿物质元素。因此，椒目有望成为一种极待开发利用的油脂资源。
    亚麻酸是人体必须脂肪酸，具有重要的生理活性：有降血脂，抗癌，提高机体免疫力等多种作用；在体内转变成2O碳5烯酸(EPA)和22碳6烯酸(DHA)，亚麻酸的研究，紫苏中芳香性生成分丁香油酚、α-蒎烯、紫苏醇等成分对人体具有参与神经细胞生物构成、增强中枢的功能圈。文献资料多为对紫苏子中α-均有较大的毒副作用。
1 仪器与试药
1．1 仪器：电子天平，METTLER TOLEDO GB-204；CSF-1A超声波发生器，上海超声波仪器厂；小型三用水箱， 北京医疗设备总厂； 气相色谱仪(Gas Chromatogram，GC)，Agilent 4890D。
1.2 试药：椒目仁油，陕西盛华药业有限公司，批号20020506；α-亚麻酸(α-Linolenic Acid，250 mg／m1)，Cayman Chemical，Catalog No.90210；十七酸(Margaric acid)，E. Merck．Darmstadt，MoL_Gew270.46；甲醇、浓硫酸、正己烷等试剂均为分析纯。

2 实验方法
2．1 色谱条件： 色谱柱，HP-5石英毛细管柱(Crosslinked5%PH ME Siloxane 15mx0.53mmx1.5μm)，柱温：185℃；FID检测器，温度：24O℃ ；进样口温度：24O℃；载气：氮气，流量30ml／min；氢气：30ml／min；空气：400ml／min；进样量3μL。
2.2 样品准备
2.2.1 对照品溶液的配置：精密量取仅α-亚麻酸对照品溶液0.04ml，甲醇溶解，定容至10ml。精密量取lml，加4ml甲醇，lmll：5的硫酸一甲醇溶液于80℃水浴回流30min，用流水使冷却后，加3ml蒸馏水稀释，再加正己烷萃取3次，每次3ml，收集上层液，定容至10ml，作为对照品溶液，备用。
2.2.2 内标溶液的配置：以十七酸作为内标，精密称取约7mg，按2.2.1的方法配置，作为内标溶液。
2.2.3 供试品溶液的配置：精密称取椒目仁油约20mg，十七酸约10mg，加4ml甲醇，lml l：5的硫酸-甲醇溶液于8O℃水浴回流30min，用流水使冷却后，加4ml蒸馏水稀释，再加正己烷萃取3次，每次3ml，收集上层液，定容至10ml，作为供试品溶液，备用。

3 实验结果
3．1 在该色谱条件下，可将仅-亚麻酸、十七酸及杂质较好的分离o
3．2 线性关系考察：分别精密量取对照品溶液0.5，1，1.5，2，2.5ml，各加入lml内标溶液，氮气吹干，精密加入0.3ml正己烷溶解，进样。 亚麻酸的峰面积对十七酸的峰面积的比值对 亚麻酸的浓度做线性回归，得方程为Y=4.4362X+0.39088，相关系数R=0.999，说明仅α-亚麻酸的峰面积在0.167―0.833mg／ml浓度范围内呈良好的线性关系。
3.3 校正因子的测定：根据3．2的测定结果计算得;校正因子为1.03，RSD=1.25%。
3．4 供试品溶液的测定：取2.2.3项下配制的供试品溶液3μL进样，按上述方法测得椒目仁油中α-亚麻酸的平均含量为70.47%。
3.5 精密度实验：取同一对照品和供试品溶液各3μL，按上述测定条件重复进样5次，测得α-亚麻酸峰面
积的RSD分别为2.76%，2.78%。表明该测定条件稳定，
3．6 加样回收率实验：精密量取2ml供试品溶液5份，分别精密加入lml对照品溶液，同法测定，按下式计
算。测得平均加样回收率为98.36%，RSD=3.62%。

测出α-亚麻酸总量-取样相当α-亚麻酸量
回收率=―------------------------------------------ x100％
添加椒目仁油中α-亚麻酸量

4 讨论
4．1 本实验对样品的处理方法进行探索，①用浓硫酸和甲醇直接酯化，由于大量结合于脂上的亚麻酸未能被酯化，故测出的含量偏低，不到20%；②酸水解后再酯化，未检出亚麻酸峰；③碱水解后再酯化，亚麻酸的峰与其他峰不能较好的分离；(4在碱性醇溶液中加热回流，测出的含量偏低，说明酯化不完全；改用酸性醇溶液回流，即本实验中所用方法，可将之完全酯化，且亚麻酸峰分离较好，故确定为样品处理方法。
4.2 实验中对样品酯化时的时间进行考察，少于30min时酯化不完全，测出的峰面积偏小；回流30min以上无明显变化，故选择回流时间为30min。

参考文献
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