《人类染色体技术与原理》翻译共同体

曾建议成立翻译共同体的，得一些战友支持，选此书练笔，一度中止，偶会继续努力！
绒毛组织培养
样本准备：20ml注射器，含6ml无血清RPMI1640及两滴500IU/ml的肝素
将绒毛组织吸入注射器内，再注入皮氏培养皿后，送至实验室处理
1。倒置显微镜下观察，用细镊子将绒毛组织与蜕膜仔细分离，可用HBSS液清洗，将样本分成两等份，一份用于直接法，一份用于培养。
2。直接法：
将皮氏盘内的培养液换成3ml 37 C 预热20%灭活的胎牛血清，1%庆大霉素，放置于5%CO2，100%湿度的培养箱
3。同步化
培养3小时后，加入0.1ml10-5MFUdR 液
孵育15小时
加入0.1ml10-3MThymidine,继续培养5小时
加入0.1秋水仙素至终浓度为10ug/ml，孵育1小时
4。收获细胞
移出培养箱，巴斯德吸管轻轻吸去培养液
慢慢加入3ml1%柠檬酸钠（预热37C），37C孵育20分钟
缓缓加入0.5ml固定液，中止低渗作用
吸去低渗/固定液，边摇边滴加新鲜固定液2ml(甲醇：乙酸，3：1），清洗绒毛组织，吸去固定液，再加入新鲜固定液2ml
冰箱过夜，或20分钟（24小时出结果）
吸去固定液，室温放置约1-2分钟，风干
加入100-200ul60%乙酸液，按样本的多少调整溶液体积大小
倒置显微镜下观察，绒毛组织释放出的游离细胞，轻轻晃动，观察其数目的多少，如满意，继续制片步骤
5。制片
制作专用的“耙子”，用巴斯德吸管，在其未端1英寸处，熔弯成90度角。“耙子”在固定细胞上来回运动，使液体分布均匀
玻片表面加热至45C
加入100ul细胞悬液至已标记的玻片表面，一手拿弯耙，另一手拿玻片，用制好的耙子弯端只与液滴相接触，而勿与玻片表面接触，沿玻片的长将液滴铺开在玻片中间部分（50%-60%），两者相互来回运动3-4次即可，撤去玻片，将剩余的悬液点样，用相差显微镜观察分裂相的分布情况。玻片在孵育炉内干燥。
6。染色
孵育后，玻片冷至室温，用30%的过氧化氢（双氧水）预处理10分钟；取其中一块玻片作胰酶及染色时间的预实验，浸入酶-PBS液（0.2ml胰酶+50mlPBS,pH 6.8)，立即取出，清水漂洗，空干，瑞氏染色3-5分钟，清水漂洗，空干。
注意：
加入FUdR和thymidine的时间可以调整，（15-17h;3-8h)
建议上午8-10AM收集标本，下午3PM加FUdR。