【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?谢谢
丁香园论坛
5852
向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题,两者的区别我基本清楚了,只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒(分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因)呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因?还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话,是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因,还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件?谢谢
同时转染两种质粒,海肾荧光素酶报告基因质粒不需做任何改造,直接用就行。
谢谢了,请问你以前做过这种实验吗,同时转染两种质粒,转染率怎么样,与只转染一种相比是不转染率要低一些?
想必楼主现在都是高手了吧,请问这两者的区别在哪里啊?双荧光素酶报告基因多了一个内参照,排除了转染的差异吗?求经验
假设第一组细胞转入100个质粒萤火海肾各50 第二组细胞转入1000个质粒萤火海肾各500个 在插入的调控基因水平一样的情况下 如果没有海肾做对照你就会得出后者调控能力是前者10倍的错误结论 而如果除以海肾后再比较就会发现俩组是同样的
我想在做的是转一个质粒,质粒上有两种报告基因,但是做出来的结果不稳定,求帮助
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming