【求助】关于钙螯合剂BAPTA-AM的负载

大家好，请问钙的螯合剂BAPTA-AM负载细胞时所用的负载液体是无钙的还是可以有钙的？
我的看法：既然BAPTA-AM能螯合钙离子，那么在细胞外也能结合大量的钙离子，如果负载液有钙，BAPTA-AM有一部分会与钙离子结合，然后进入细胞内，这导致了单纯BAPTA-AM浓度的改变，同时也会促使一些被螯合的钙离子借助BAPTA-AM进入细胞，虽然进去以后也是螯合状态。不知道这种看法正确吗？请大家指正。
另外，用BAPTA-AM去螯合细胞内钙离子的实验，是否要保证实验时无细胞外钙，如果有，当某些因素如细胞去极化导致外钙大量内流，这时候进入细胞内的BAPTA有足够量螯合进入的钙离子吗？要取消掉细胞的内钙的影响，是否必须做一实验验证BAPTA-AM的螯合能力？
谢谢？

哇，居然没人给予解答，难道我这个问题很白痴？还是没人做过？

问了老外，得到一部份答复,供大家参考:
Thank you for contacting Sigma-Aldrich Technical Service. It is not necessary to use calcium free buffers to dilute the stock solution because the BAPTA-AM will not bind any calcium until the AM is cleaved off by esterase activity within the cell.

I hope you found this information to be helpful. If you have any questions or concerns, please do not hesitate to contact us by telephone at 1-800-325-5832 or by replying to this email for further assistance.

在细胞内的BAPTA还会再到细胞外吗？而且细胞外钙会不会随着细胞内钙的消耗而流向胞内。

BAPTA-AM AM是什么意思啊

我看大部分外文文献用的BAPTA-AM AM量30uM，是不是足够螯合细胞内的钙释放和钙内流呢？