求助！钙成像实验

呵呜口乎

2023-04-24

最近看文献看到说用钙成像的方法可以检测出不同浓度，不同味觉刺激物下味觉细胞的反应，(我也是研究味觉的)，文献里面用的是灌流的方式将不同的溶液去刺激细胞，然后用荧光显微镜或confocol去拍荧光，有荧光变化说明这个细胞对刺激物有反应。

我有疑惑问题是：

1.在荧光显微镜上要怎么给细胞灌注不同的溶液?

2.能否不灌注，直接用板子多做几个孔对应加不同的溶液去拍荧光?

3.还有这种钙成像实验拍出来的是照片，怎么能做出文献结果里面那种峰值图?

请问园里有没有大神有做过相似的实验？能不能指导一下我这个科研小白，不胜感激！！

(附文献里的参考步骤和结果图)

loveliufudan

2023-04-24

有帮助

1.给细胞灌注不同的溶液通常可以使用温和的灌流系统，例如可以使用微注射泵和针头将溶液缓慢地灌入特定位置。这种方法需要特殊的仪器和技术，需要较高的实验技能。

2.直接用板子多做几个孔对应加不同的溶液去拍荧光是可行的。这种方法比较简单，但需要注意的是，在加入不同的溶液之前，要将细胞平稳地定位在视野中。

3.钙成像实验通常可以使用专门的软件来分析数据并生成峰值图。这些软件通常可以根据时间序列数据计算出钙离子浓度的变化，并将其呈现为峰值图。常用的软件包括ImageJ、MetaFluor和Calcium Imaging Analysis。

土井挞克树

2023-04-24

有帮助

1.给细胞灌注不同的溶液要用到微量注射器进行注射

2.不注射在每个孔内加不同溶液也是可以的，可以得到相同的荧光效果