【求助】如何选择IκB抗体

各位前辈，我接下来的实验要检测NFkB通路的活化状况，现在在订购抗体时遇到了问题：我准备订购IκB Antibody 和Phospho-IκB来反映NFkB通路的活化状况，发现Cell Signaling Technology提供了IκBα ，IκBβ ，IκBε和IκB-ζ和相应的磷酸化抗体，我应该订购那种亚型的抗体呢？希望前辈给于指点。

你看你要做什么检测IκB抑制的是NF-kB哪两个亚基了。
比如，国内一般人大多检测的都是p65和p50个二聚体，因为IκBα 是p65和p50个二聚体的天然抑制剂，这个只要做IκBα 和磷酸化IκBα 就可以了。其他的都不用做。一般的文章都是这样做的。
但是，你要遇到特殊的通路，等等，具体情况要具体对待的。你可以参考这篇文章给你提供的知识

非常感谢00501101战友！

（1）直接做IkBa的磷酸化和总蛋白表达就行。看IkBa的磷酸化是否增加，以及IkBa是否降解。

（2）如果IkBa发上了磷酸化和降解后，在检测下游的NF-kB的激活情况（NF-kB的磷酸化，NF-kB的核转位，NF-kB的报告基因是否激活）

（3）有条件的话，最好能把IkBa的泛素化也做了，这样数据更丰富。

（4）建议除了IkBa之外，最好把上游的IKKa/b的磷酸化情况也一同检测了，因为IKKa/b是IkBa的上游激酶，直接调控IkBa的激活，这样做了之后就行形成一条完整的信号通路了。

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