简介
B 细胞在特异性抗原、抗 Ig 抗体和（或）促有丝分裂原等的激活后，可发生活化、增殖。
材料与仪器
试剂：
（1）纯化的 B 细胞。
（2）抗 IgM 抗体、细菌 LPS（E．coli；Difco＃011B4）。
（3）可溶性 CD40L、抗鼠或人 CD40 抗体。
（4）含 10％ FCS 的 RPMI 1640 培养液。
仪器：
（1）48 孔平地培养板，
（2）流式细胞仪
步骤
B 细胞活化的基本过程可分为以下几步：
（1）纯化的 B 细胞，用含 10％ FCS 的 RPMI 1640培养液调整 B 细胞浓度为 10／ml。
（2）向 48 孔平底培养板中加入1ml B 细胞悬液，即 1x10／孔。
（3）向 B 细胞悬液中加入下列刺激物之一，每个条件设 3 个复孔：
1）抗 IgM 抗体，2～200μg／ml；
2）LPS, 1~100μg/ml;
3）sCD40L, 0.03~0.1μg/ml;
4）抗 CD40 抗体，0.2～0.5μg／ml；
5）不加任何刺激剂，阴性对照。
（4）将培养板置于 37℃、5％ CO2 细胞培养箱中培养 24～72 小时，即可得到活化的 B 细胞。
（5）收集 B 细胞，用 FACS 法表面标记活化 B 细胞的表面分子，如 MHC II 类分子、CD80 和 CD86 等的表达。
来源：丁香实验
