求助：NF-κB通路激活后检测靶基因

理论上转染后24h即可，但需要考虑转染这个质粒后是否能够激活NF-KB？还是得需要LPS能激动剂？

我认为可以延长转染时间，或者增加转染剂的浓度，目前看还是没有达到转染条件

下面是一些可能导致这种情况发生的原因和建议：

转染效率可能较低，导致基因过表达量不够高，无法观察到差异表达。建议优化转染条件，包括选择更高效的转染试剂、优化细胞密度、转染时间和过表达载体浓度等。

QRT-PCR实验中可能存在一些误差或变异性，导致结果不够准确或重复性不好。建议在实验过程中注意控制实验参数，例如RNA提取、反转录、引物设计、PCR条件和数据分析等。

可能需要更长时间才能观察到差异表达。NF-KB通路涉及多个基因和复杂的信号传递网络，可能需要更长时间才能看到影响。

在实验设计方面可能需要进一步优化。例如，可以增加重复次数，使用更多的控制组，包括阴性对照和阳性对照，以便更好地比较实验结果。

可能需要进行更全面的分析。除了QRT-PCR之外，可以使用其他技术，例如Western blot、免疫组化等，来确认结果。