【求助】基因转录和表达的时间?
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我有一篇文章修回。审稿人怀疑我结果的可靠性。其中一个结果是将细胞在缺氧的条件下培养4小时后,检测两个目的基因的转录和表达,RT-PCR以及细胞免疫化学染色都提示该目的基因发生了转录并表达。但是,审稿人认为仅仅4个小时这些基因(CD31和CD34)还不能转录和表达,因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。因此,审稿人怀疑我的结果。我想请教各位大侠,是否能帮忙查找一些文献表明很多基因的转录/表达可以在4小时之内完成。谢谢。
dm0920 wrote:
我有一篇文章修回。审稿人怀疑我结果的可靠性。其中一个结果是将细胞在缺氧的条件下培养4小时后,检测两个目的基因的转录和表达,RT-PCR以及细胞免疫化学染色都提示该目的基因发生了转录并表达。但是,审稿人认为仅仅4个小时这些基因(CD31和CD34)还不能转录和表达,因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。因此,审稿人怀疑我的结果。我想请教各位大侠,是否能帮忙查找一些文献表明很多基因的转录/表达可以在4小时之内完成。谢谢。
转染的基因还是细胞本身表达的?
我觉得转染进去的基因4小时表达一般不可信吧,呵呵,一般24小时以上。
如果是细胞的内源基因,那么应该是缺氧时就有表达了。能不能说一说实验过程?呵呵
dm0920 wrote:
但是,审稿人认为仅仅4个小时这些基因(CD31和CD34)还不能转录和表达,因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。
审稿人是不是理解错了,认为CD31和CD34是你转染的基因,还是你文章的表述有问题,审稿人应该不会犯这样的错误把。其实转染的基因24小时就够了,转过GFP的都知道。
从你的表述看,CD31和CD34不是你转染进去的基因。。。缺氧诱导的基因表达,4个小时绝对够了。缺氧可是生死攸关的事情,怎么可以拖拖拉拉,呵呵。
找文献支持。。。应该是很容易的,最笨的办法,在PUBMED上输入你的目的基因,再加上你要的关键词,比如expression,慢慢看吧。。。
lalala_2004 wrote:
审稿人是不是理解错了,认为CD31和CD34是你转染的基因,还是你文章的表述有问题,审稿人应该不会犯这样的错误把。其实转染的基因24小时就够了,转过GFP的都知道。
从你的表述看,CD31和CD34不是你转染进去的基因。。。缺氧诱导的基因表达,4个小时绝对够了。缺氧可是生死攸关的事情,怎么可以拖拖拉拉,呵呵。找文献支持。。。应该是很容易的,最笨的办法,在PUBMED上输入你的目的基因,再加上你要的关键词,比如expression,慢慢看吧。。。
细胞合成相应的蛋白以应对外界不良环境(应激反应),那么是不是可以参考一下热休克蛋白表达的所需时间是多少?
有点好奇,缺氧后,细胞面临着能量供应不足,不知CD31和CD34在这方面有什么作用?否则为什么花那么大的力气来合成CD31和CD34蛋白(蛋白合成过程需要消耗大量能量啊)?
谢谢各位的帮助。检测的目的基因CD31和CD34是内源性的基因,不是外源基因转染的。因为这两个基因是血管内皮细胞的标志分子,所以才检测的。目前正在找文献支持。
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