WB方法

我想用人血标本做WB，请问血标本最多可以放多久啊？还有做WB的话，要收集大概多少毫升血就可以了呢？

为什么没有人回复我啊？

建议你还是自己摸索一个量
首先，不知道你要做的目的蛋白是什么？分子量有多大？是不是容易降解？
如果分子量大，不容易降解，那可以储存比较长时间，如果你的目的蛋白是小蛋白那就是越新鲜越好吧，我看过师姐做的12KD蛋白，样本稍微放长些时间就悲催了
其次，western blot的过程是有标准化的，但是蛋白上样的量跟你抗体，发光体系的选择也是有一定关系的，我做过一个36KD左右的蛋白在ECL发光时在一样的一抗浓度下，ECL发光用到50ug也就跟奥德赛双色显色系统用20ug一样的效果。你可以尝试从1.0板 15孔 20ug（这应该是最省样本的了吧？）先做起，看内参情况调节上样量，把内参砸漂亮了就差不多了，总之，每个实验都不一定非得要上20ug，我个人的体会。不足之处，不要扔砖头啊

真的很谢谢你啊