纤维素酶的分离纯化方法

问：本人要做纤维素酶的分离纯化，请高手传授方法。

答：纤维素酶并不是单一的蛋白酶，而是一个酶系，其中包括至少3种组分。如果你用重组菌表达其中的一个片段或者产酶基因，那么要看你的载体是什么？如果有亲和标签可以用亲和层析，如果没有，那就只能考虑疏水或离子交换等方法了。不过工业上制备纤维素酶一般是不用纯化的，中试以上规模的酶制剂生产大多采用真菌发酵，纤维素酶会直接分泌到培养基中，然后通过结晶就可以得到粗酶颗粒，一般不需要色谱纯化。

答：3种组分可能都是说得轻的，这每种组分可能都是多种酶组成的酶系，甚至有可能是有机组装的分子机器--（俺猜测。。。因为纤维素酶的协同作用还是相当厉害的）。不同来源的纤维素酶降解纤维素的机理、侧重点都会不相同，很多基因还没弄清楚，基因工程不太能做，现在商品化的纤维素酶恐怕都是传统育种方法得到的菌株。

一般采用不同的纯化方式：如阴离子、阳离子交换等，搜集每个峰去做各种酶活分析。多亚基、多组分、多种催化活性、纤维素本身又太复杂，你还要格外提防协同作用。