判断PCR阳性的标准

一、条带宽不超过1mm，边缘整齐；

二、条带在期望的碱基大小之内；

三、背景上无smears,也无引物二聚体的出现则是PCR扩增失败，而非阴性反应；

四、如果出现期望的碱基大小之外的其它条带，不管是否有期望大小的条带，均应作为人工假像看待；

五、在临床标本检测时，尤其对于肿瘤标本，除预期条带外，经常有以外条带或smear现象，但只要其亮度明显低于目的条带，也应视为阳性；

六、对于某些情况，尤其在自己设计引物时，如果经费允许，还是应该抽样测序验证。因为用一对引物扩出同一家族不同成员的情况也是有的，如果恰巧这些成员长度相等，则用上述原则无法判别。

比如当我在扩MAGEs基因时，曾经一对引物扩出其家族的6个成员，产物均是1000bp左右。实际是MAGE1-6,要是你的原则，那都是MAGE3了。还有我曾用一对引物扩出小鼠，大鼠，兔，人，豚鼠的IgG 1Fc产物均为750bp；

七、阴性反应我理解为:由于模板的不存在而使PCR扩增失败。所以是否阴性反应还应和阴性对照相比较。阴性反应没有二聚体和Smaer现象情况并不少见；当然最常见的情况还是二聚体和Smear现象(我们这称为“大马路”)；

八、条带整齐就可以了，1mm的标准无法实施，条带越小，胶越稀，跑得越远，带越宽。做这些试验，往往是研究生，新手上路，不必要求太严格了。