丁香实验_LOGO
登录
搜索
    搜索
    热门搜索
    rabbit igg (hhla-a*02:01pcrhuman igg (hwbkatchem硼化学(cas熔解曲线探针法goat anti-rabbit igg (hgoat anti-mouse igg (htrizol法同时提取rna、dna、蛋白质
    提问
    我要登录
    ｜免费注册

    阳性克隆检测PCR问题

    相关实验：聚合酶链式反应（PCR）

    user-title

    wangchangshui

    我用上游引物A和下游引物D扩增出一条1500bp的条带，回收、然后用内侧引物B和C检测回收产物，很特异，条带很亮，然后连接PMD19-T，M13检测有一条1500bp的条带，用引物A和D检测也很特异，但是用引物B和C检测，却什么都没有，一直想不通为什么？新手，谢谢。
    wx-share
    分享

    2 个回答

    user-title

    过客一名

    有帮助
    要不用M13引物或你的引物A或D去测个序，看看究竟连接的片段是什么？
    user-title

    alaling

    有帮助
    如果你是为了看条带是不是你想要的，建议最好采用测序的方法
    如果你是为了看是不是有多种引物组合，很有可能是B和C对该序列不特异，即无法特异扩增你所需要的条带。

    相关产品推荐

    探针法定量PCR预混液（无ROX），2×，阿拉丁

    探针法定量PCR预混液（无ROX），2×，阿拉丁

    ￥659.90

    重组高热稳定DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

    重组高热稳定DNA 聚合酶，EnzymoPure™，阿拉丁

    ￥462.90

    2×常规PCR预混液，2×，阿拉丁

    2×常规PCR预混液，2×，阿拉丁

    ￥92.90

    2×常规PCR预混液（含染料），2×，阿拉丁

    2×常规PCR预混液（含染料），2×，阿拉丁

    ￥92.90

    抗体染料法定量PCR预混液（通用ROX），2×，阿拉丁

    抗体染料法定量PCR预混液（通用ROX），2×，阿拉丁

    ￥741.90

    相关问答

    问

    PCR有产物但是电泳无结果是为什么？

    10 回答 10131 围观
    2020-09-23

    问

    电泳时条带跑出凝胶，是什么情况？

    12 回答 8645 围观
    2019-12-04

    问

    PCR各反应体系中模版DNA和引物的量分别是多少？如何确定的？

    1 回答 7105 围观
    2013-10-23

    相关方法

    PCR技术

    TaqMan 荧光探针

    分子信标法

    推荐阅读

    PCR产物的电泳检测可能出现那些问题

    PCR 问题总结

    我遇到的PCR问题

    无忧采购 轻松科研

    无忧采购 轻松科研

    提问
    扫一扫
    丁香实验小程序二维码
    实验小助手
    丁香实验公众号二维码
    扫码领资料
    反馈
    TOP
    打开小程序