CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计

前期记录

先确定目标基因

CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因

然后对目的基因进行背景调查

CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查

设计 sgRNA 及引物

CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计

CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后

对前期文章的补充：

设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：

但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上来看一下。

提交订单，等待引物到达：华大基因的速度非常快，大约在 2 - 3 个工作日即可拿到，在等待期间需要准备好：

1. LB + 抗生素抗性平板；

2. 感受态细胞及相应培养基；

3. 无内毒素的 Cas9 载体质粒；

4. BbsI 限制性内切酶；

5. 质粒小提试剂盒；

6. 常规限制性内切酶。