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免疫荧光染色如何分析?

相关实验:免疫荧光技术

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材料与仪器

Image J 软件

步骤

免疫荧光主要判断目的蛋白的定位,实验过程中会染表征细胞核的 DAPI。拿到免疫荧光结果,使用 PS 等软件进行 merge,如果染色结果只在 DAPI(蓝色)周围有一圈,即细胞膜定位;如果染色结果显示 DAPI 周围到处都有,即胞浆定位;如果染色结果和 DAPI 完全 merge,即细胞核定位。

定量化细胞骨架:点击 Image → Type → 8-bit 可以二值化图像转换成黑白,分析骨架 Analyze → Skeleton → Analyze Skeleton (2D/3D);

面积测定:图像转为 8-bit 后,调整阈值,框选细胞及核,Analyze → Set Measurements,可以 Measure 细胞整体面积或单个面积。

来源:丁香实验

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