简介
丙酮酸脱氢酶系是一多酶复合体，定位于线粒体，由丙酮酸脱氢酶（pyruvatedehydrogenase，PDH）、二氢硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶激酶、丙酮酸脱氢酶磷酸酶、功能未知的蛋白 X 和一些辅助因子等共同构成。其中以丙酮酸脱氢酶的功能最为重要，催化丙酮酸脱羧成乙酰 CoA。丙酮酸脱氢酶的活性可以评价细胞柠檬酸循环代谢的速率。
原理
丙酮酸脱氢酶的检测原理是利用 PDH 抗体将 PDH 酶复合物吸附并固定于检测孔，然后加入反应底物 CoA。PDH 催化 CoA 生成乙酰 CoA，释放出 CO2，并使 NAD＊转换为 NADH。NADH 可进一步催化反应标记物呈现颜色反应（黄色），在 450 nm 检测吸光度值可计算 PDH 的酶活性。
材料与仪器
1、PDH 抗体
2、反应底物 CoA
步骤
丙酮酸脱氢酶活性检测的基本流程如下：
A、利用 PDH 抗体将 PDH 酶复合物吸附并固定于检测孔，然后加入反应底物 CoA。PDH 催化 CoA 生成乙酰 CoA，释放出 CO2，并使 NAD＊转换为 NADH。NADH 可进一步催化反应标记物呈现颜色反应（黄色）。
B、在 450 nm 检测吸光度值可计算 PDH 的酶活性。
来源：丁香实验
