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蛋白跑胶比较淡,考虑蛋白浓度稀释,怎么浓缩蛋白

相关实验:有氧氧化过程关键酶和重要产物测定

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起雪飞舞

蛋白跑胶比较淡,考虑蛋白浓度稀释,怎么浓缩蛋白

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3 个回答

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lyang556

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常用的是透析浓缩,可以用透析袋。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋结扎,把高分子聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将装有蛋白液的透析袋放入配好的30%-40%浓度的吸水剂中。

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bamboopiggy

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收样的时候少加lysis,或者上样的时候加倍上样量。实在不行提好抗体浓度。如果要浓缩,可以直接用超滤柱,超滤。但是我感觉你的问题,用超滤柱来弄,有点麻烦。

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bqejjh123

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蛋白质的浓缩有很多方法。大致有超滤法,沉淀法和透析法。超滤比较温和,对蛋白质不会有修饰和改变,蛋白的种类一般不会有丢失。它的缺点是总样品的量可能会减少(被膜所吸附)。另外超滤对样品的要求比较高。甘油,去垢剂都会堵塞滤膜,影响超滤的效果。沉淀法比较快速,容易操作,对盐,甘油,去垢剂的耐受性好。缺点是可能会有部分种类的蛋白没有被沉淀下来(丢失)。沉淀法中,又以 TCA 法最为普遍使用。使用 TCA 法时,一定要用冷的纯丙酮清洗蛋白沉淀两次,去处残留的 TCA 和其他沉淀下来的杂质。透析法只使用于量比较大的样品,量小时,操作困难。 透析法可以和超滤法联用。先把样品透析到一个比较干净的环境( 不含盐,甘油,去垢剂或其它杂质,比如碳酸氢氨溶液),然后再进行超滤。

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