【求助】NF-KB抑制后活性检测
丁香园论坛
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各位大虾，有个问题想请教，就是使用NF-KB抑制剂PDTC抑制NF-KB后，怎样能知道是否抑制成功？时间紧迫，希望高手们能积极赐教，谢谢！
PDTC的作用是抑制IkB的降解（prevent NF-kB activation by a mechanism that involves inhibition of I-kB degradation followed by IKK-induced phosphorylation，一篇文献的原话）
RNA干扰后测表达NF-kB的表达鉴定效果，我见过文献报道不少。
在Blood的一篇文献上看过另外一个抑制剂（好像是蛋白酶体抑制剂,阻止IkB的降解）的验证，他测了核蛋白和DNA活性。但是，我不知道这个抑制剂是不是影响NDA活性，这个该不该测我最近也在思考。
但是PDTC测抑制效果，个人认为他阻止了NF-kB解离，测定核内的NF-kB的含量（做个western或者共聚焦）是最起码的。测NF-kB表达则没有用。
RNA干扰后测表达NF-kB的表达鉴定效果，我见过文献报道不少。
在Blood的一篇文献上看过另外一个抑制剂（好像是蛋白酶体抑制剂,阻止IkB的降解）的验证，他测了核蛋白和DNA活性。但是，我不知道这个抑制剂是不是影响NDA活性，这个该不该测我最近也在思考。
但是PDTC测抑制效果，个人认为他阻止了NF-kB解离，测定核内的NF-kB的含量（做个western或者共聚焦）是最起码的。测NF-kB表达则没有用。
00501101 wrote:
PDTC的作用是抑制IkB的降解（prevent NF-kB activation by a mechanism that involves inhibition of I-kB degradation followed by IKK-induced phosphorylation，一篇文献的原话）
但是PDTC测抑制效果，个人认为他阻止了NF-kB解离，测定核内的NF-kB的含量（做个western或者共聚焦）是最起码的。测NF-kB表达则没有用。
笔误?
抑制了IKBα的降解，自然NF-kB就无法解离了，在胞浆内，IKBα和P65、P50二聚体结合。体内IKB起抑制NF-kB作用，IKBα无法降解，NF-kB就无法解离，所以不能激活入核发挥作用。
少写了一句，引起大家的误会了，哈哈
少写了一句，引起大家的误会了，哈哈
请问如何检测p65/p50或者p50/p50二聚体呢？
western就可以检测啊
请问western检测NF-KB活性是抽提核蛋白检测p65，还是检测磷酸化p65？
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