简介
Feulgen 染色技术是显示 DNA 定量测定的主要染色方法之一。
原理
Feulgen 染色技术的基本原理是标本通过 60 ℃ 的 1mol/L HCl 水解作用，可将 DNA 分子中嘌呤碱基与去氧核糖之间的糖苷键打开，所形成的醛基具有还原作用，它再与无色品红结合形成紫红色化合物，从而显示出 DNA 的分布。
材料与仪器
器材：恒温水浴箱、染缸、石蜡切片。
试剂：
① Carnoy 固定液（纯乙醇 60 ml，加氯仿 30 ml，加冰醋酸 10 ml）
② Schiff 试剂（15 ml 1 mol/L HC1 加 0.5 g 碱性品红，摇动使之溶解（不加温），加 0.6％ 偏重亚硫酸钠（钾）85 ml，棕色瓶中密封，或黑纸包好，室温避光 24 h。第二天观察，溶液呈淡淡的草黄色，再加 300 mg 活性炭，摇 1 min，过滤后呈无色的 Schiff 试剂溶液。）
③ 1 mol/L HC1
④ 碱性品红
⑤ 偏重亚硫酸钠（钾）（先配 10％ 的亚硫酸钠溶液，取 10 ml，加 200 ml 蒸馏水，再加 10 ml 1 mol/L HC1，摇匀）
⑥亚硫酸钠
⑦ 固绿染色液
⑧ 梯度乙醇
⑨ 二甲苯
⑩ 蒸馏水
⑪ 中性树胶
步骤
Feulgen 染色技术的基本过程可分为如下几步：
A. 先将恒温水浴箱达到 60 ℃ 恒温。
B. 烤干后石蜡切片经两道二甲苯将石蜡脱去。共约 40 min，以脱净石蜡为准。
C. 用两道无水乙醇将二甲苯洗去。共约 6 min。
D. 经 95％、90％、80％ 及 70％ 乙醇脱水。每道 2 min。
E. 蒸馏水。
F. 蒸馏水 60 ℃ 1 min（染缸应提前 10 min 放在恒温水浴箱预温）。
G. 1 mol/L HC1 60 ℃ 8～10 min（染缸应提前 10 min 放在恒温水浴箱预温）。
H. 1 mol/L HC1（室温）1 min。
I. Schiff 试剂 1 h。
J. 偏重亚硫酸钠洗液洗三次。
K. 自来水→蒸馏水。
L. 固绿染色液 1～2 min（可省略）。
M. 蒸馏水。
N. 95％ 乙醇、无水乙醇各两道，每道 2 min。
O. 二甲苯两道，每道 20 min。
P. 中性树胶。
注意事项：切片不经过 60 ℃ 蒸馏水和 60 ℃ 1 mol/L HC1，直接进入室温的 1 mol/L HC 18~10 min。
注意事项
1. 1 mol/L HC1、60℃ 下水解时间要适当。如水解时间不够，反应会变弱；如水解时间过长，则脱氧核糖也易脱掉，反应也会减弱。水解时间长短要视标本的类型（如厚薄等）、固定剂的性质以及酸的浓度而定。
2. Feulgen 反应成功与否的一个非常关键的因素是 Schiff 试剂的质量。Schiff 试剂的配制方法有误直接影响 DNA 的染色反应。
3. 因 Carnoy 固定固定一般 6 h 左右，如白天取材标本需经 95％ 乙醇 4 ℃ 过夜。
4. 实验要设对照组，以便验证实验反应的结果。
来源：丁香实验
