HE 为酸性染料,显示胞核、细胞质以及某些细胞器,是组织学及病理学检查最基本的方法。
苏木素-伊红染色技术的基本原理是 HE 为酸性染料,显示胞核、细胞质以及某些细胞器,是组织学及病理学检查最基本的方法。适用于各种脏器的一般观察,对各种液体固定的组织均可使用。不同脏器所用的固定液往往不一致,作用时间也不一样。
苏木素-伊红染色技术的基本过程可分为如下几步:
A. 烤干后石蜡切片用两道二甲苯将石蜡脱去。共约 40 min,以脱净石蜡为准。
B. 用两道无水乙醇将二甲苯洗去。共约 6 min。
C. 经 95%、90%、80% 及 70% 乙醇脱水。每道 2 min。
D. 蒸馏水
E. 苏木素(染细胞核)。一般 2~3 min(示苏木素配方而定)
F. 自来水
G. 蒸馏水洗
H. 1% 盐酸乙醇溶液(分色),2~3 s
I. 自来水。
J. 碳酸锂饱和水溶液(反蓝)
K. 蒸馏水洗
L. 1% 伊红溶液 10~15 s(示伊红颜色而定)
M. 两道 95% 乙醇脱水数秒(需要快速过,时间长易褪色)
N. 两道无水乙醇脱水 2~3 min
O. 两道二甲苯透明共 40 min
P. 树胶封固
1. 实验室常以 95% 工业乙醇来配制各种低浓度的乙醇,因 100% 纯乙醇要比 95% 乙醇价格昂贵,一般不用于稀释。
2. 苏木素配制此染液的关键在于碘酸钠的量。
① 要根据季节气温的改变,适当调整碘酸钠的量,配方里碘酸钠的量一般只适用于夏天,随着气温降低,氧化速度降低,可适当增加碘酸钠的量,要注意应该从 0.05 g 开始一点点增加,过量的碘酸钠可使苏木素过氧化,不仅容易失效,而且核浆共染。
② 称量要准确,避免染不上或染得很慢。此液也是进行性苏木素液,从理论上说染色不需要分化,但适当深染后再分化,染色效果更好。