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吉姆萨染色技术

相关实验:组织学基本技术

别名:Giemsa

最新修订时间:

简介

吉姆萨染色技术是一种简便、快速适用于多种细胞、细胞涂片和染色体染色的技术,常用于细胞培养试验,此外,在临床中多用于淋巴造血系统的细胞标本、胸腹水、穿刺标本等的染色。

原理

吉姆萨染色技术的基本原理是吉姆萨染液由天青、伊红组成。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,呈粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,呈紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色,称为中性物质。

材料与仪器

器材:研钵、pH 试纸、细胞涂片。

试剂:

① 吉姆萨(吉姆萨粉 0.6 g、甘油 50 ml、甲醇 100 ml,将吉姆萨粉溶于甘油内,在研钵内研磨使之磨匀无颗粒,56 ℃ 保温 2 h 后加入纯甲醇搅拌均匀,放入深棕色瓶内室温保存,两周后即可使用)


② 甘油


③ 甲醇

④ 磷酸缓冲液(1% 磷酸氢二钠 20 ml,1% 磷酸二氢钠 30 ml,加蒸馏水至 1000 ml,调整 pH 6.8~7.4)


⑤ 蒸馏水


⑥ 甘油或甘油明胶

步骤

吉姆萨染色技术的基本过程可分为如下几步:

A. 甲醇固定标本 10 min。

B. 蒸馏水漂洗干净。

C. 稀释染液(取磷酸缓冲液 9 份,吉姆萨染液 1 份充分混合),将染液滴在组织或细胞上,滴染 10~15 min。

D. 蒸馏水漂洗干净,紧急时可趁湿加盖片镜检,或者进入下一步骤。

E. 甘油或甘油明胶封片(明胶 10 g 溶于蒸馏水 50 ml 中搅拌,放入 37 ℃ 的恒温箱中过夜。第二天再加入甘油 50 ml,加入约为 1% 量的麝香草酚(一小粒)搅拌,然后存放于 4 ℃ 冰箱中,用时取出,用热水温暖瓶外促其溶解即可使用。)。

注意事项

1. pH 对细胞染色有直接影响,实验操作中的稀释染液应现用现配。

2. 染液贮存过程中,必须塞严,以防止甲醇挥发和被氧化。

来源:丁香实验

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