Hoechst-PI 染色法

1. 主要试剂的配制

碘化丙锭贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液：100 μg/ml，4℃ 避光保存。

2. 操作流程

2.1 常规制备单细胞悬液（方法同 PI 染色法），加入 Hoechst 33258 溶液，使其终浓度为 1 μg/ml，37℃ 孵育 7 min，离心后弃染液，用PBS重悬。

2.2 加入 PI 染液，使其终浓度为 5 μg/ml，置冰块上片刻，离心弃染液，用 PBS 洗 1 次后，即可上机检测，紫外激光记录 400～500 nm 处蓝色荧光和 >630 nm 处红色荧光。

3. 结果观察

正常对照细胞呈弱蓝色及弱红色荧光，凋亡细胞呈蓝色及弱红色荧光，死亡细胞呈强红色及弱蓝色荧光。