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Hoechst 33342/PI双染色法

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1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。
2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。
3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。
4.400目的筛网过滤1次。
5.流式细胞仪分析。

 

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