原理
研磨是破碎单一细胞的有效措施。借助研磨中磨料和细胞间的剪切及碰撞作用破碎细胞。常 用的磨料为沙子、氧化铝在研钵内样品与磨料被研磨成厚糊状。一次破碎的细胞量湿重可达 30 g。
材料与仪器
细菌或酵母或一些植物组织
石英砂或氧化铝 缓冲液
高速珠磨匀浆器
石英砂或氧化铝 缓冲液
高速珠磨匀浆器
步骤
1. 加 20 g 淸洗过的细胞入预冷的研钵内;
2. 准备 40 g 石英沙或氧化 铝;
3. 在研磨细胞的过程中逐步加入石英沙或氧化铝,即边研磨边加入。加完磨料再继续研磨几分钟;
4. 用 60 ml 缓冲液混悬细胞糊,离心除去细胞碎片和磨料。
注意事项
1. 此法主要用于细菌、酵母和一些植物组织。研磨操作一般不超过 15 min。
2. 石英沙或氧化铝用前做清洁处理。
3. 研磨时产生劈啪声可能是效果不错的好兆头。
来源:丁香实验