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融化96孔板上的细胞

相关实验:将基因转移至未分化 ES 细胞实验

最新修订时间:

材料与仪器

ES 细胞冻存板 MEF 滋养板 塑料盒 ES 生长培养基 微量移液器

步骤

1. 准备下列试剂和材料:

96 孔 ES 细胞冻存板

24 孔 MEF 滋养板

塑料盒

ES 生长培养基

微量移液器

2. 在塑料盒内装入无菌水,置温箱中预热。

3. 从 -80℃ 冰箱中取出 96 孔 ES 细胞板。

4. 欲融化的每孔加 100 μl 预热(37℃)ES 生长培养基。盖上盖,在温箱内的塑料盒中放 2 分钟左右,使细胞快速融化。

5. 融化细胞转移到每孔有 2 ml ES 生长培养基的 24 孔 MEF 滋养板。

6. 孵育 3~5 小时,ES 细胞吸附。

7. 换 2 ml ES 生长培养基。

8. 3 天后孔中克隆可见。

9. 每 1~2 天换一次 ES 生长培养基。充分生长后,细胞 1:5 传代于 MEF 滋养板。

来源:丁香实验

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