原理
心肌组织是最早利用的培养材料,Carrel曾长期培养过鸡胚心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物。最常用的是鸡胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎儿心肌等都可应用。心肌是比较容易培养和生长的组织,可应用多种方法进行培养,如悬滴培养、组织块培养和消化培养法等,主要取心室肌培养,均能获得良好的生长效果。
材料与仪器
受精鸡卵
BSS 胰蛋白酶 酒精 碘酒 眼科剪 玻璃棒
培养瓶
BSS 胰蛋白酶 酒精 碘酒 眼科剪 玻璃棒
培养瓶
步骤
1. 选新鲜受精鸡卵,置温箱中孵育(温箱中放有水槽,以维持箱内湿度);每日翻动一次(180 度),孵育9~12 天;
2. 取鸡胎;
3. 用眼科剪剪开胸腔,剥出心脏,置入皿中用Hanks液漂洗1~2 次;
4. 小心剪除大的动静脉,保留心室肌;用组织块或消化培养法均可。
初代培养的鸡胚心肌呈纺锤形,并常杂有成纤维细胞和内皮细胞;心肌细胞亦较基它成分贴壁慢,也可用消化反复贴壁法排除其它细胞成分。在培养成功时,相差显微镜下可观察到横纹;一周后便可出现节律性收缩现象。
2. 取鸡胎;
3. 用眼科剪剪开胸腔,剥出心脏,置入皿中用Hanks液漂洗1~2 次;
4. 小心剪除大的动静脉,保留心室肌;用组织块或消化培养法均可。
初代培养的鸡胚心肌呈纺锤形,并常杂有成纤维细胞和内皮细胞;心肌细胞亦较基它成分贴壁慢,也可用消化反复贴壁法排除其它细胞成分。在培养成功时,相差显微镜下可观察到横纹;一周后便可出现节律性收缩现象。
来源:丁香实验