植物组织化学显微镜标本片制作方法

先用滴管在洁净载玻片中央滴一滴清水，然后把准备好的材料放在载玻片上的水滴中，用摄子或解剖针将材料展开，使各部分都在同一平面上；用摄子夹起盖玻片，使盖玻片的一边接触水滴边缘，然后轻轻放下盖玻片，避免产生气泡。盖玻片下的水过多，会溢出到显微镜上，可以用吸水纸从盖玻片的一侧吸去多余水分；如果水不能在盖玻片下铺满，则容易产牛气泡，可从盖玻片的一侧再加一点清水，将气泡驱走。如果所做的临时装片需要染色，可在盖

1 材料准备和修整一般应在适当时期选取发育正常有代表性、软硬适度的新鲜根、茎、叶材料，用刀片将其切成 2-3cm 长的小段，井将其切面削平；若为质地较软而薄的材料如叶片，可沿主脉两侧切成宽 5-6mm 、长 1-1.5cm 的小块，夹在支持物（如萝卜、胡萝卜根、马铃薯块茎等）中进行切片。使用支持物时要先将支持物切成 3-5cm 长、0.5cm 宽的立方形小块，将其中部纵切一缝，然后将修整好的材料夹

石蜡切片法的整个过程较复杂，可大体概括为：取材-固定-脱水-透明-浸蜡-包埋-修块-切片-精片-脱蜡分染色-脱水-透明-封藏 石蜡制片程序如下： 1 材料采集、分割：采集材料应根据制片的目的和要求而定，材料要有代表性和完整性，无病虫害及其他损伤。根据所采集材料的特征，依据不同的分割方法分割为适当的大小，分割大小一般不超过 0.5-1.5cm3。如果是子房、花药，就不需进行分割。 2 杀死与固定：

由于材料不同、研究的目的不同，以及所用的脱水剂、透明剂、封藏剂不同，整体封藏法有多种方法。1. 甘油法甘油法是最常使用的一种制片方法。甘油法是用甘油脱水和透明，并封藏于甘油中，方法简单并可保持植物的自然颜色。对于制作含有色素的材料（如绿藻）效果较好，必要时还可以进行染色，故可有染色和不染色两种制片法。以水绵为例，依据下列步骤可制成染色的和不染色的封片。(1)不染色制片法小采集新鲜水绵，用水洗净附着

1 铬酸－硝酸离析法适用于木质化的组织，如导管、管胞、纤维等。离析液由 10%铬酸和 10%硝酸等量混合而成。具体步骤是将植物材料（如木材、枝条、果壳等）先切成火柴棒粗细、长约 1cm 的小条或小块，放人小玻璃管中，加人离析液，其量约为材料的 20 倍，将口盖严塞紧，放在30-40℃的温箱中，经 1-2d。具体浸渍的时间可因材料块的大小而不同，如果两天以后仍未分离，则可换新的离析液继续浸渍。草本植

1 幼根的培养 取洋葱或大蒜的鳞茎置于广口瓶上，瓶中盛满清水，使洋葱或大蒜的下部（鳞茎盘）浸人水中，置于温度在 20-25℃的温暖处，并注意每天换水， 3-5d 后，即可长出幼根。 2 材料的固定和离析 先用等量的浓盐酸和 95%酒粘配成混合液，这种溶液既能迅速杀死细胞并保 其细胞结构接近于生活状态，又能溶解细胞间的中胶层，在压片时使细胞易于分散，故称其为固定离析液。当上述幼根长到 2-3cm

1 显示纤维素的化学方法：植物细胞的细胞壁最主要的成分是纤维素。纤维素在碘和硫酸的作用下变成蓝色。在细胞中，纤维素的成分越多，蓝色越明显，而强烈木质化的细胞壁，对纤维素虽然仍能发生上述反应，但因它被木质掩盖，因此不能作用，而小变蓝色。方法是用 1%碘液（配制方法：先将 1.5g 碘化钾溶于 100mL 蒸馏水中，待全溶解后，加入 1g 碘，震荡溶解）滴在材料上，然后再加一滴 66.5%硫酸 (7

1 取材：用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小块。太大固定液不易透入，造成材料内外固定不均；太小则材料受损伤的比率增高。取材时应注意：由于取材时要求切的组织块很小，组织受损伤的比例相当大，这无疑会引起细胞代谢的巨大变化，因此，切取后的组织应立即放人固定液中进行固定；植物体大多数部位的组织是由各种类型细胞组成的，因此在取材之前必须对材料所包含的细胞类型有比较清楚的了解。特别注意要使试验和对照