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动物成体干细胞制备技术

实验分类:

实验动物

最新修订时间:

简介

成体干细胞是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞,这种细胞能够自我更新并且能够特化形成组成该类型组织的细胞。成体干细胞存在于机体的各种组织器官中。成年个体组织中的成体干细胞在正常情况下大多处于休眠状态,在病理状态或在外因诱导下可以表现出不同程度的再生和更新能力。近年来,随着人们对成体干细胞的不断深入了解,成体干细胞在发育生物学,组织再生以及药物开发中占据越来越重要的位置。

来源:丁香实验团队

操作方法

全骨髓贴壁筛选法制备骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞(BMSCs)广泛存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量最为丰富,由于骨髓是其主要来源,因此统称为骨髓间充质干细胞。目前体外用于分离纯化 BMSCs 的方法主要有 5 种:① 利用 BMSCs 与培养底物的黏附性采用的全骨髓贴壁筛选法;② 根据 BMSCs 低密度特性采用的密度梯度离心法;③ 根据 BMSCs 的细胞表面标志,采用相应的荧光素标记抗体进行染色的流式细胞仪分选法

密度梯度离心法制备骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞(BMSCs)广泛存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量最为丰富,由于骨髓是其主要来源,因此统称为骨髓间充质干细胞。目前体外用于分离纯化 BMSCs 的方法主要有 5 种:① 利用 BMSCs 与培养底物的黏附性采用的全骨髓贴壁筛选法;② 根据 BMSCs 低密度特性采用的密度梯度离心法;③ 根据 BMSCs 的细胞表面标志,采用相应的荧光素标记抗体进行染色的流式细胞仪分选法

脂肪干细胞的制备

ASCs 是一种脂肪组织来源的间充质干细胞,具有干细胞的共性,即自我更新及多向分化的能力,可取自自体,遗传背景稳定,可在体外培养、扩增及诱导。原代 ASCs 经过 2~4 天的潜伏期后,迅速集落性扩增,细胞与 MSCs 类似呈均一的梭形的成纤维状形态,倍增时间为 33~38 小时。基因和超微结构表明 ASCs 也具有强大的分化可逆性。

脐带间充质干细胞的制备

脐带是连接胎儿与胎盘的条索状组织,其表面有羊膜覆盖、呈灰白色,脐带中央有一条脐静脉两条脐动脉。血管周围为含水量丰富的来自胚外中胚层的胶样胚胎结缔组织,称为华通胶(Wharton jelly)。免疫学表明从脐带华通胶中分离到的成纤维样细胞具有多能干细胞的潜能。

造血干细胞的制备

造血干细胞是迄今为止研究得最为透彻的成体干细胞,可以用两个特征来定义造血干细胞:一是可以进行自我更新,二是可产生所有血细胞类型。经过近 50 年的研究,人们对造血干细胞的了解不断深入,造血干细胞早已应用于临床,用于治疗癌症、血液疾病以及一些免疫系统疾病,同时有分化成除血细胞以外的细胞类型的能力,如神经细胞、肌肉细胞以及肝细胞等,与其他成体干细胞相比有不可比拟的优势。

神经干细胞的制备

神经干细胞的研究是目前神经科学和其他相关学科研究的热点之一。现已证实在皮质、室管膜下层、纹状体、海马、中脑等区域都存在神经干细胞。神经干细胞可被生长因子诱导而增殖并保持分化成神经元及胶质细胞的潜能,移植后能在宿主的神经组织中良好地生存、整合及分化,神经干细胞的发现、研究和应用,将在神经系统发育、神经损伤的修复、神经退行性疾病、神经组织移植和脑肿瘤的基因治疗等多方面起到重要的作用。

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