实验动物

胎粪吸入综合征 (meconium aspiration syndrome，MAS) 是指胎儿在宫内或产时吸入胎炎污染的羊水，发生气道阻塞、肺内炎症和一系列全身症状，以呼吸窘迫为主要表现的一组综合征，多见于足月儿和过期产儿。新生儿胎类吸 入综合征动物模型 (animal models of newaborn meconium aspiration syndrome) 的制备，通常选用新生猪、羊和犬

除了造影成像以外，骨骼标本的制作，组织学的特殊染色等也是研究骨组织的常用表型分析方法。目前，组织学分析实验主要有包括 3 种：小鼠骨骼标本制作及双色染色、骨组织脱钙（快速、慢速）及切片 HE 染色和 TRAP 染色。

转基因肿瘤动物模型 ( animal models of transgene tumor) 将产生某些肿瘤的基因作为外源基因，构建出的人类肿瘤转基因动物模型，能帮助人们研究癌基因活性及肿瘤的发生机制和发展过程，并为肿瘤治疗提供实验依据。目前构建转基因肿瘤动物模型主要采用以下途径：直接将癌基因及促进肿瘤发生、发展的基因转入到动物体内，使这种基因能够在特定的组织表达或非特异性表达；转人肿瘤血管生成调控

异种动物移植由于免疫排斥反应，常导致移植失败，其难度大。故选择合适的移植宿主是移植成功的关键。将体外培养的人癌细胞系成功移植于裸鼠，其体内的人体肿瘤在裸鼠体内仍保持其原有的组织学形态、特有的染色体组型及对化学放射治疗的原有特性。根据移植部位分为皮下移植瘤和原位移植瘤。

胚胎移植俗称人工授胎或借腹怀胎，是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。本质上即生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。利用胚胎移植技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。卵巢移植即将某一雌性动物的卵巢整体切除并移植给另一去除卵巢的雌性动物卵巢部位。卵巢移植对于治疗卵巢癌等恶性疾病具有重要意

移植性肿瘤动物模型是指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成的肿瘤。肿瘤移植于健康动物相当于活体组织培养，可长期保存瘤种，供实验所用。移植性肿瘤动物模型是目前抗肿瘤药物筛选最常用的体内方法，在肿瘤研究中具有重要作用。

目前，血清学检测实验主要包括：血生化和激素水平检测实验。

食管癌动物模型，在动物饮水中添加化学致癌剂来诱发食管癌。目前，用于食管癌动物模型的建立方法主要有 2 种：甲基苄基亚硝胺 (MBNA) 法和二氨黄樟素 (dihydrosafrole) 法。

肺癌动物模型，通过灌注的方式，使动物诱发肺癌。目前，用于肺癌动物模型的建立方法主要有 2 种：焦油沥青 (GTP) 法和气管内注入苯并花、硫酸铵气溶胶、甲基胆蒽等物质法。

鼻咽癌动物模型，利用化学致癌物通过注入鼻尖的方式，使动物诱发鼻咽癌。目前，用于鼻咽癌动物模型的建立方法主要有 2 种：二甲基单蒽法和二乙基亚硝胺法。

对怀疑其生殖能力有问题的小鼠，将进行一系列的表型分析实验以确定此类型的雌性小鼠是否可育。如果不可育，此类小鼠所表现的症状是什么，导致不育的原因。这些实验数据能够为寻找导致雌性不育的原因提供参考。目前，雌性生殖生物学分析实验主要包括：生育力检测实验、血清激素检测实验、超数排卵实验、各时期卵泡数量统计实验、卵母细胞体外成熟实验、卵细胞体外受精、发育实验。

目前，胰岛素功能相关检测实验主要有【5】种：膳食糖耐量试验（MTT）、腹腔或口服葡萄糖耐量试验（IPGTT 或 OGTT）、胰岛素耐受实验（ITT）、小鼠胰岛的分离纯化和分离胰岛的糖刺激下胰岛素分泌检测（GSIS）。

对于人类来说，体检结果和临床病史为一般诊断的常规要素，如激素分泌不足或过剩，往往伴随身高、体重、肤色及行为等各方面的异常，身体瘦弱或过于肥胖与脂质或糖代谢方面的异常相关，体重减轻而食量增加可能为高代谢的甲状腺疾病或糖尿病后期症状等。对于小鼠，虽然获得临床病史是不可能的，但密切有效的观察及血液学的检测结果等也可以提供相应的线索。目前用于代谢及内分泌系统常规观察实验的方法主要有 5 种：SHIRPA、

冻存（cryopreservation）是生物材料保存的主要方法之一。利用冻存技术将胚胎、配子或卵巢置于-196 ℃液氮中低温保存，可以使胚胎、配子或卵巢暂时脱离生长状态而将其生理特性保存起来，这样在需要的时候再复苏用于实验。适度地保存一定量的胚胎、配子或卵巢，可以防止因意外事件而造成丢种，起到了胚胎、配子或卵巢的保种作用。除此之外，还可以利用冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些特殊基因型的胚胎

体外受精（in vitro fertilization，IVF）是指在体内或者体外成熟的卵母细胞与获能精子，在体外环境中完成受精的技术过程。在生物学中，把体外受精胚胎移植到母体后获得的动物称试管动物（test-tubeanimal）。这项技术不仅对于配子发育、成熟、受精和早期胚胎细胞分化的研究有理论意义，对于解决人类不孕不育等社会问题也具有重要意义，在生产方面对加速动物的繁衍也具有广泛的实践价值。

卵母细胞冷冻保存技术，使得各种动物卵母细胞资源的充分利用成为可能，为体外受精、核移植、转基因动物生产等胚胎工程操作提供丰富、便捷的材料来源，从而为其走向产业化、商业化开辟道路。此外同精子冷冻保存、胚胎冷冻保存一样，卵母细胞冷冻保存也可建立种子库，为良种家畜、珍稀动物、濒危动物和任何个体的基因提供一种保种新途径。其中，人类卵母细胞冷冻保存是辅助生育技术的重要组成部分、可满足不孕患者生育子女的要求．并

包埋后的组织经过普通玻片切片后即可进行 HE 染色以达到形态学的观察需求，如果需要免疫组化或荧光分析，则切片时需要使用粘片剂处理玻片，防止多个操作步骤中的掉片。HE 染色是最传统的通过细胞核和胞质的嗜酸、碱性特点不同而分别将其染成天蓝及玫红色的鲜艳色泽以观察组织形态的染色方法。

组织形态异常的原因一方面可能是受炎症因子或其他信号分子刺激下发生整体组织结构改变，也可能为发育期细胞增殖、凋亡异常造成的先天性结构缺陷，增殖凋亡分析也因此成为研究发育期或成体病如肿瘤等病理过程中的常规检测手段。目前用于检测增殖、凋亡的方法主要有 2 种：BrdU 掺入及增殖检测实验和 TUNEL 检测凋亡实验。

病理分析（pathological diagnosis）是表型分析中极为重要的一环，无论对于何种系统和组织，组织学上所反映出来的差异及缺陷通常最具有说服力，因此正确的组织采集和处理过程是病理分析的基础而重要的步骤，对病理切片的正确分析则需要由有经验的专业人员进行。小鼠常规病理分析步骤一般包括：活体采血（可选）；麻醉（灌流用）；固定在解剖板上；开胸心脏灌流固定（可选）；取得完整的目的组织；组织称重（

通过组织学观察初步判断病理发展情况后，通常需要进一步在原位确认潜在的高/低表达分子，以推测病理表型的分子基础。此时就需要使用免疫组织化学的方法，定性/半定量地考察目的蛋白的表达情况。有时为了更精确地确定蛋白表达的确切位置，需要使用与标志蛋白共定位的免疫荧光手段实现多个分子共染，并在共聚焦显微镜下独立通道扫描叠加图像取得高分辨率的荧光共染结果。