胰岛素功能相关检测实验

同所有的代谢和内分泌测试一样，小鼠遗传背景是很重要的。糖耐量试验表明肝脏浓缩和储存葡萄糖的效率，胰腺产生胰岛素的能力，有活性的胰岛素的量及体细胞对其的灵敏度。OGTT 优于 IPGTT 或糖钳的地方在于其是在正常生理条件下进行的，并保持了肠道对激素的反应，及生理条件下葡萄糖吸收和胰岛素分泌的动力学。GTT 的结果可能显示糖耐量正常或异常。糖耐量下降，即血糖曲线高于野生型，通常提示该个体糖清除能力较

胰岛素耐受实验的基本过程可分为如下几步：A. 小鼠准备每组实验（如不同基因型或给药组）小鼠数量不得少于 6 只，对照组必须是同年龄、同性别的小鼠。于上午 9 点将小鼠换入干净的笼子禁食 6 小时，至下午 3 点。禁食期间，小鼠保持正常的饮水。B. 下午 3 点，开始胰岛素耐受实验。称取每只小鼠的体重，并用标记笔在小鼠尾巴的根部标记序号，以便在实验过程中能快速辨认所测小鼠。C. 将小鼠从笼子中取出，

对胰岛功能不仅可以体内评估，也可以将胰岛分离出来在培养条件下检测其胰岛素分泌功能，以排除其他组织对整体分析结果的影响，因此分离胰岛作为对胰岛功能独立检测及提取蛋白质或 RNA 用于分子研究都是极为有用的基本操作。

分离胰岛的糖刺激下胰岛素分泌检测的基本过程可分为如下几步：A. 准备 12 孔板，每个孔加入 750 μl 的 KRB buffer。B. 在体视显微镜下，将 CO2 培养箱中培养的胰岛用 20 μl 移液器挑选出来，放入 12 孔板中，每个孔放入 15～20 个胰岛，尽量保证各个孔的胰岛大小和数目一致。C. 将 12 孔板于 37 ℃ CO2 培养箱中放置 1 小时，使胰岛适应培养液的转换（从