基于杆状病毒的展示和基因传递系统

构建杆状病毒展示文库 材料 试剂 小牛肠碱性磷酸酶 DNA， Ac-omega 杆状病毒 DNA 和待插入的目的片段 乙 醇（70%) IPL-41 (粉状培养基， pH6.2±0.1，渗透压约 400mOsmol) 脂质体制剂（Cellfectin; Invitrogen ) 苯酚：氯仿 磷酸盐缓冲液（PBS)

重组展示病毒滴度的检测 材料 试剂 抗体 羊抗鼠辣根过氧化物酶（HRP) 标记的二抗 使用前按 1 :4 〇〇 用 PBS-Tween 稀释。 鼠源性抗_gp6 4 抗体 使用前用 P B S -T 稀释。 杆状病毒 . 蓝辣根过氧化物酶底物 乙醇 固 定 剂（fonny 卜 buffered ace

被感染昆虫细胞表面展示的病毒蛋白质的免疫荧光分析 材料 试剂 抗体 针对目的蛋白或多肽的一抗 焚 光 接 合 的 二 抗（如 A le x a F lu o r D yes; Invitrogen) 杆状病毒：重组展示和野生型 3 % 牛血清白蛋白（BSA) 的 PBS 溶液 DABCO (25m g/m l 溶 于 M o

重组展示病毒的免疫电镜分析 材料 试剂 抗体 针对目的蛋白质或多肽的一抗 二 抗（可选） 杆 状 病 毒（蔵糖梯度纯化 ；S u m m e r s and Smith I9S7; King and Possee I” 2;O ^eillyetaL 1994) 去离子蒸馏 使用前〇 • 22um 滤器过滤除菌。 1

杆 状 病 毒 介 导 的 基 因 递 送 效 率 的 监 测 材料 试剂 细胞生长培养基（完全培养基，无血清和选择性培养基） D-荧光素： 0.6m m o l /L 荧 光 素 溶 于 〇.6m o l/L 柠 檬 酸 钠 缓 冲 液 中（p H5.0) (Sigma-Aldrich) 分装，每管 2 ml, - 20℃保存。在使用时，