细胞增殖 、分化及其调控的分析检测实验

细 胞 周 期 的 检 测 (Pagano et al.2000) 细 胞 计 数 1 ) 试剂 0.25% 胰蛋白酶溶液、无血清培养液。 2 ) 设备 显微镜、计数板。 3 ) 操作规程 (1) 准备计数板：用乙醇清洁计数板和专用盖玻片，用绸布轻轻擦干。 ⑵制备细胞悬液：制备单个细胞悬液。本法要求细胞密度不低于 IO4 个

干细胞的研究也需要从分子生物学水平上进行，一些基本的分子生物学实验，如凝胶电泳、载体的构建、转染细胞等，在干细胞实验中也频繁用到。由于生命科学研究的发 展 ，分子生物学研究技术也越来越多，越来越完善，分子生物学实验指南就概括了所有基本的实验操作，各种反应试剂盒的出现使实验操作更加简便，也提高了实验的效率。本节就干细胞实验中用到的常规操作进行简单的描述。 细 胞 组 分 的 提 取

增殖分化调控机制的研究 载 体 的 制 备 目的基因的克隆是分子生物学实验中的核心内容，起着承上启下的作用，通过克隆技术可实现目的基因的无限扩繁、长期保存的目的；利用该技术能实现基因-组、基因改造、构建工程菌和转基因动植物。基因克隆技术主要包括载体的获取、酶切、脱憐、连接和转化及筛选、鉴定等内容 (奥斯伯等 2001)。在干细胞增殖、分化调控机制的研究中常用到的克隆载体主

干细胞增殖分化调控研究范例 -- 由生命现象到功能分子 CD3 4 分子是公认的造血干细胞阳性标志，此外，不表达造血细胞各分化系表面标志的细胞也是分化上更为原始的细胞，即 Lin- 细胞。目前临床和基础研究中分离造血干细胞的方法都是针对 CD3 4 分子来进行的。然 而 ，动物体内的造血重建实验证实，不论是小鼠 还 是 人 在 Lin-TCD34-细胞群中都含有具有自我更新和多系

利 用 EST2 诱 导 体 系 表 达 notch细 胞 内 结 构 ，确 定 其 对 分 化 的 影 响 主 要 设 备 与 试 剂 Gene PulserII 电转仪(Bio-Rad)、流式细胞仪(Becton Dickinson)、 IL-3、 G-CSF、 4-轻基三苯氧胺(OHT)、 G418、 Flag、 myc抗 体 。 实 验 方 法 (