免疫细胞化学技术-细胞固定

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

免疫细胞化学技术-细胞固定，是免疫细胞化学技术步骤之一。目前，用于免疫细胞化学技术-细胞固定的方法主要有 3 种：贴壁细胞的固定-脱水法、贴壁细胞多聚甲醛交联法和悬浮细胞多聚甲醛的固定。

原理

根据实验方法不同，对应的原理也有所不同：

贴壁细胞的固定-脱水法的基本原理是亲水的有机溶剂能够迅速溶解脂类物质，因此能够产生通透效应，并且迅速使蛋白质脱水，导致细胞蛋白质沉淀于亚细胞结构上，能够被抗体所识别。

贴壁细胞多聚甲醛交联法的基本原理是多聚甲醛能够使蛋白的氨基酸基团与细胞内其他分子相互连接，交联成网状结构，从而使抗原固定在原位上，再经去污剂溶解脂类成分，增强细胞的通透性，然后被抗体所识别。

悬浮细胞多聚甲醛的固定的基本原理是多聚甲醛能够使蛋白的氨基酸基团与细胞内其他分子相互连接，交联成网状结构，从而使抗原固定在原位上，再经去污剂溶解脂类成分，增强细胞的通透性，然后被抗体所识别。

来源：丁香实验团队

操作方法

贴壁细胞有机溶剂固定，也称贴壁细胞用有机溶剂脱水法，是常用的细胞固定方法之一。

贴壁细胞多聚甲醛固定法，也称交联法，是免疫细胞染色步骤之一。

悬浮细胞多聚甲醛固定法，是细胞免疫荧光步骤之一，悬浮细胞染色通常用于检测细胞表面抗原，无须进行透化处理。