简介
悬浮细胞多聚甲醛固定法，是细胞免疫荧光步骤之一，悬浮细胞染色通常用于检测细胞表面抗原，无须进行透化处理。
原理
悬浮细胞多聚甲醛固定法的基本原理是多聚甲醛能够使蛋白的氨基酸基团与细胞内其他分子相互连接，交联成网状结构，从而使抗原固定在原位上，再经去污剂溶解脂类成分，增强细胞的通透性，然后被抗体所识别。
材料与仪器
器材：离心机、摇床、细胞计数板。
试剂：
① 4% 多聚甲醛（临用前配制）;
② PBS ;
③ 含 0.2% TritonX-100 或 NP-40 的 PBS。
步骤
悬浮细胞多聚甲醛固定法的基本过程可分为如下几步：
A.PBS 配制 4% 多聚甲醛。
B. 用 PBS 洗涤细胞 2 次，200 g 离心 5 分钟；重悬细胞。
C. 用 4% 多聚甲醛溶液悬浮细胞，细胞浓度约为 1x106/ml，室温下静置 15 分钟, 不时摇动。
D. 200 g 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，重复洗涤细胞 2 次；
E. 用含 0.2% TritonX-100 或 NP-40 的 PBS 溶液透化细胞 2 分钟（室温下），有的抗原需 15 分钟，具体时间视具体抗原而定。
F. 200 g 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，重复洗涤细胞 2 次。
注意事项
在检测细胞表面抗原时，步骤E和F通常被省略。
来源：丁香实验
