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细胞增殖 、分化及其调控的分析检测实验
干细胞是指具有多向分化潜能和自我更新能力的细胞。干细胞既可以从胚胎中分离得到,也存在于多种成体组织中。干细胞的细胞周期从本质上说并无特殊之处,但是受精卵 (可以视为全能干细胞) 的细胞周期没有 G 1 期 ,从成体组织中分离得到的干细胞往往处于 G 0/G1 期。作者:裴雪涛,本实验来自「干细胞实验指南」
实验概况收录 5 操作方法 · 3 相关文章
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
下面的方案是从蜕皮激素诱导的哺乳动物表达系统(Invitrogen 公司)附带的方案修改而来。Stratagene 公司也出售相似的系统。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
调控的挫伤模型
调控的挫伤模型的基本造模方法可分为如下几步:A. 选用小鼠作为模型。B. 10% 水合氯醛 (5 ml/kg) 腹腔注射麻醉, 通过选定的椎间隙, 用一气体动力学圆筒带上一个可伸缩的轴, 以接触脊髓形成撞击界面, 圆筒被安装于一个可调的交叉头架上, 以便定位和控制脊髓变形的量。C. 当以压迫变形量 10%~75% 和以 0.5~7 次/秒速率变化时, 可以产生一个高程度的机械重复率, 可供选择的压迫时间从 10 毫秒至几秒, 输入的空气压力可在撞击界面产生足够大的驱动力, 以超过脊髓组织受压
操作方法所属实验:骨髓损伤动物模型
蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
材料缓冲液和溶液贮存液稀释到适当浓度。新霉素松甾酮 A蜕皮激素的另一种类似物是 muristerone A(Sigma 公两)。Zeocin培养液适合要转染的细胞生长的培养液根据不同需要,培养液必须补充 Zeocin、新霉素和松甾酮 A。附加试剂本方案步骤 1、2 和 6 需要列在第 16 章适合的转染方案中的试剂。本方案步骤 4 需要列在本章方案 6 中的试剂。本方案步骤 8 需要列在第 6 章方案 8、第 7 章方案 8 或附录 8 中的试剂。载体和菌株带有荧光素酶报道基因并受蜕皮
操作方法所属实验:蜕皮激素调控诱导细胞基因表达实验
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表观遗传调控的原理和概念

表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变,即基因型未发生变化而表型却发生了改变。换言之,这是一种DNA序列外的遗传方式。基因组含有两类遗传信息:一类是传统意义上的遗传信息,即DNA序列所提供的遗传信息;另一类是表观遗传学信息,它提供了何时、何地、以何种方式去应用遗传信息的指令。 现代研究发现,异常的表观遗传可能导致发生肿瘤、自身免疫病、衰老、神经精神异常和多种儿科综合征。表观遗传学主要是对染色质重塑、DNA甲基化及组蛋白修饰、X染色体失活、非编码RNA调控等多方面进行研究

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机制上的那些事儿 基因调控

,是他作为转录因子,调控了下游基因。 b、增强子调控。这个难度很大,增强子一般跟启动子不在一起,且有时离得很远,增强子研究,一般来说,是研究增强子的突变,突变造成其活性改变。当然,只有核酸是不行的,也有研究结合蛋白的。 c、启动子。启动子的调控,除了转录因子对其的调控外,还有其自己的修改改变。比如,组蛋白甲基化,组蛋白乙酰化,启动子 CG 岛核苷酸的甲基化,等等,这些修饰造成启动子结构的改变,使得其高级结构打开,双链打开,效率发生改变,从而造成转录效率的改变。表观遗传的范畴,大家明白

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四环素作为可诱导基因表达的调控物实验
下面的方案分成 3 个阶段:用 pTet-tTAk 稳定转染成纤维细胞,稳定转染可诱导表达 tTA 的 NIH-3T3 细胞,分析转染细胞中的蛋白表达。稳定转染细胞系表达反式激活因子和靶基因分为两个阶段。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
心肌肌浆网钙-三磷酸腺苷酶的活性测定
心肌肌浆网钙-ATP酶(SERCA2a)在心肌细胞内的钙稳态调控中起主要作用,对SERCA2a在IPC过程中基因转录调控的研究有可能从基因表达调控层面揭示SERCA2a在IPC中的作用和机制。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
四环素作为可诱导基因表达的调控物实验
分析或免疫印迹法测试细胞中 tTA 的诱导表达。然后如阶段 2 所述,用靶质粒转染表达 tTA 的细胞系。稳定转染的 NIH-3T3 细胞中,通常诱导 6 h 后可以观察到 tTA 和靶基因的表达,再过 6 h 后,表达量达到最大值。阶段 2: 四环素调控的靶基因稳定转染可诱导表达 tTA 的 NIH-3T3 细胞材料缓冲液和溶液小 牛 血 清( 10%)HEPES 缓冲液磷酸缓冲液酶和缓冲液合适的限制性内切酶1X 胰酶-EDTA0.05% 胰酶0.5 mmol/LEDTA(pH8.0)培养液含有
操作方法所属实验:四环素作为可诱导基因表达的调控物实验
增殖分化调控机制的研究
增殖分化调控机制的研究载 体 的 制 备目的基因的克隆是分子生物学实验中的核心内容,起着承上启下的作用,通过克隆技术可实现目的基因的无限扩繁、长期保存的目的;利用该技术能实现基因-组、基因改造、构建工程菌和转基因动植物。基因克隆技术主要包括载体的获取、酶切、脱憐、连接和转化及筛选、鉴定等内容 (奥斯伯等 2001)。在干细胞增殖、分化调控机制的研究中常用到的克隆载体主要有以下两类:①宿主为大肠杆菌的细菌质粒;②动物细胞为宿主的动物病毒和以动物病毒为基础改造的穿梭质粒。载体特点:①在宿主细胞中具
操作方法所属实验:细胞增殖 、分化及其调控的分析检测实验
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你了解基因表达调控

基因表达调控包括转录水平、转录后水平和翻译水平。转录调控是指通过改变转录速率从而改变基因表达的水平,其对遗传信息的传递的准确性和多样性具有重要的作用。真核生物的转录调控包括多种形式,例如DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、转录因子等。真核生物基因转录在细胞核内进行,而翻译则在细胞质中进行,因此转录后调控是基因表达调控的另一个重要方面,主要包括RNA可变剪接、RNA甲基化以及多种调控RNA(miRNA、lncRNA、circRNA)参与的转录后调控等。尽管在真核生物中,基因调控主要发生在转录

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文速递献|胶质瘤的嗅觉调控机制

为 3-8 人/10 万人,恶性胶质瘤患者中位生存期仅 15 个月。作为大脑基本功能单元的神经元,与恶性胶质瘤细胞交流密切,但目前尚不明确神经元活动是否会直接调控恶性胶质瘤的发生。同时,以神经元活动为基础的大脑正常生理功能,比如外界的感官刺激,是否能直接影响恶性胶质瘤的发生与发展呢?   嗅觉感知调控恶性胶质瘤发生      2022 年 5 月 11 日,浙江大学医学院刘冲研究员团队在 Nature 杂志发表了题为 Olfactory sensory experience regulates

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心肌肌浆网钙-三磷酸腺苷酶的提取
心肌肌浆网钙-ATP酶(SERCA2a)在心肌细胞内的钙稳态调控中起主要作用,对SERCA2a在IPC过程中基因转录调控的研究有可能从基因表达调控层面揭示SERCA2a在IPC中的作用和机制。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
转基因小鼠制备实验
转基因小鼠制备实验可应用于:(1)动物发育研究;(2)研究细胞功能调控机制。
实验概况收录 1 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
二聚体介导的体外基因表达调控
二聚体介导的体外基因表达调控材料试剂二 聚 体(本 节 描 述 的 二 聚 体 的 化 学 结 构 如 图 3 所 示)雷 帕 霉 素 类 似 物 A P 2 1 9 6 7 和 A P 23102 (A R I A D 公 司)雷 帕 霉 素(Sigma-Aldrich 公 司 , 目 录 号 R 〇 395)通 常 此 化 合 物 为 干 粉 ,应 在 密 封 容 器 中 避 光 保 存 于 一 2 〇°C 。N ,N-二 甲 基 乙 酰 胺 (D M A ; 如 Sigma
操作方法所属实验:二聚体介导的基因表达调控实验
二聚体介导的体外基因表达调控
二聚体介导的体外基因表达调控材料试剂本节描述的已构建的载体及雷帕霉素二聚体均来自A R I A D 公司的 A R G E N T 转录调控质粒试剂盒(w w w .ariad.c o m /regulationkits) 适宜I E细胞生 长 的 培 养 基二 聚 体(本流程描述的二聚体的化学结构如图2 所示)雷帕霉素类似物A P 2 1 9 6 7 和 A P 23102 ( A R I A D 公司)雷 帕 霉 素(Sig m a-Aldrich公司,目录号R 0395)通常此化合
操作方法所属实验:二聚体介导的基因表达调控实验
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